告别摇瓶,微孔板培养+超灵敏定量,质粒提取效率翻倍
来自:junmin 更新日期:2026/6/26 点击量: 1633
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在分子生物学实验中,质粒 DNA 的制备与定量是基因克隆、PCR、转染及测序等核心步骤的基础。传统方法常依赖于大体积的摇瓶培养,步骤繁琐、耗时且试剂消耗量大。如何实现小体积、高效率、高灵敏度的质粒制备与定量,是提升实验室通量与重现性的关键。
小体积培养, 如何保证质粒产量与质量? 通常,质粒提取需要至少几毫升的过夜菌液。而利用 96 孔微孔板进行小体积(如 200 μL)细菌培养,不仅能大幅节约培养基和抗生素,更便于进行高通量筛选与平行实验。但随之而来的挑战是:微量培养后的菌体量少,提取的质粒 DNA 浓度低,如何实现准确定量?
一体化方案: 从培养到定量,全程精准监测
Molecular Devices 推出的高效工作流,结合SpectraMax iD3s 多功能微孔板读板机与 Quant-iT™ PicoGreen™ dsDNA 高灵敏度荧光检测,完美应对这一挑战: 01 细菌生长实时监控 使用 iD3s 的振摇与温控功能,在 37 ℃ 下对 96 孔板中的大肠杆菌进行长达 18 小时的连续监测,每 15 分钟读取一次吸光度,精准掌握生长曲线,确保培养一致性。
02 高效微量质粒提取 培养结束后,直接使用磁珠法质粒提取试剂盒(如 Mag-Bind® Ultra-Pure Plasmid DNA 96 Kit)进行纯化,适配 96 孔深孔板,轻松实现高通量、自动化操作。 03 超灵敏 DNA 定量 提取的质粒 DNA 通常浓度较低。PicoGreen 荧光染料对双链 DNA 具有极高亲和力,检测灵敏度可达 50 pg/mL,动态范围跨越四个数量级,即使微量样本也能获得准确浓度。
为何选择 SpectraMax iD3s + SoftMax® Pro?
内置 Protocol,一键运行:SoftMax Pro 软件内置 PicoGreen 检测方案,包含优化的激发/发射波长(490 nm/530 nm)、PMT 增益与读板高度,确保数据准确可靠。
01 自动计算,结果直观: 软件可自动生成标准曲线(R² 常大于 0.998),并根据样本荧光值直接计算浓度,同时显示重复孔的标准偏差与变异系数,数据可信度一目了然。
02 平台灵活,结果一致: 该方法同样适用于具备荧光检测功能的 SpectraMax iD5e 等机型,为不同通量需求的实验室提供一致的高质量数据。实验数据显示,从微孔板小体积培养中提取的 20 个质粒样本,浓度在 134.8 ng/mL 至 993.8 ng/mL 之间,全部落在标准曲线范围内,证明该方法稳定且覆盖范围广。
总结:让质粒制备更省时、 更省力、更精准 传统“摇瓶+分光光度计”的模式正在被更集成、更智能的微孔板解决方案所替代。通过 SpectraMax iD3s 微孔板读板机实现从细菌生长监测到 DNA 荧光定量的全程一体化操作,不仅节省样品与试剂,更通过自动化与高灵敏度检测,显著提升实验效率与数据可靠性。质粒提取,本可以更简单。
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