接轨药典新规：GxP 7.5 软件在 9401 生物活性验证方案升级和实践

中国药典中的 9401 又升版了

让我们来看看有哪些变化吧

1名称修订为：“生物制品体外生物活性/效价测定方法验证指导原则”，明确适用范围为“体外生物活性/效价测定方法”。

2引入国际共识的“分析方法生命周期”理念，将验证与方法开发、持续维护、再验证结合，明确验证是生命周期的重要环节，而非独立流程；提出分析目标概况（ATP），作为验证指标、可接受标准制定的基础。

3完善验证策略并补充验证指标：新增选择性、样品稳定性指示特性、总分析误差等指标并明确其定义；精密度评价补充方差分析法，与原评价方法并列；验证指标相对准确度及精密度增加置信区间判定要求。

4新增验证研究结果的应用内容：明确可利用验证研究的精密度结果确定日常检测中报告值的重复策略，并为样品稳定性研究设定效价变化判定临界值。

5验证实例更新：新增体外法验证的实例（第二个验证方案），删除原体内方法的实例。

6补充统计学工具：增加基于 OOS 的可接受标准计算公式及样本量确定方法。

根据 9401 新增的第二个验证方案，有大神已经手搓了一个 Excel 演算模板，但苦于 Excel 没有审计追踪。MD 公司新发布了 SoftMax Pro 7.5 GxP 软件，具备完整的系统审计追踪系统，并且在数据隐私和安全性上做了重大改进，使其充分符合新的 FDA 21 CFR Part 11 和 EudraLex Annex 11 的要求。响应广大生物科研者的呼声，我在 MD 酶标仪软件——SoftMax Pro 7 版本中创建了新 9401 的验证方案一和验证方案二的分析模板，在分析模板中推演了验证方案的整个演算过程，软件的分析结果与 9401 实例展示的分析结果全部一致。大家可以使用此分析模板在带有审计记录的 GxP 软件中完成方法验证中的计算过程。需要提醒大家的是，由于相对效价测定方法各具特点，并随分析对象而变化，因此需要视具体情况制订相应的验证指标和可接受标准，分析模板中的验证指标和可接受标准也可随之更改。

在下文中，以验证方案二为例，详细向您展示在软件中的推演过程和分析结果。

01

将验证方案二实例的表 5 中的数据分别导入 Time1 板和 Time2 板，然后按照不同效价水平进行分组，如此分组是为了相对准确度分析和精密度方差分析。

02

按照新 9401 中相对准确度评价方法项下的计算公式，在 SoftMax Pro 7 软件中计算每个效价水平相对效价报告值的相对偏倚及其 90% 的置信区间。软件中的计算结果与实例中展示的计算结果完全一致。

03

精密度的验证

按照新 9401 中精密度评价方法项下计算公式，在 SoftMax Pro 7 软件中计算每个效价水平相对效价的总变异及其 95% 置信上限。软件中的计算结果与实例中展示的计算结果完全一致。

04

线性验证

以相对效价理论值的对数（横坐标）对其相应的效价测定值的对数（纵坐标）作图，采用最小二乘法进行线性回归，并以相对效价理论值的对数作横坐标，以各效价水平的残差作纵坐标，做残差图。在 Softmax Pro 7 软件中可直接进行线性回归拟合和残差图，软件的拟合结果和残差图与实例中展示的曲线拟合结果和残差图一致。

05

范围验证

验证方案二实例中相对准确度、精密度和线性均符合要求的效价水平范围为 64%～156%，涵盖了其质量标准范围下限（80%）的 80% 至上限（125%）的 120%。

经过上述验证，证明该分析模板是可靠的。我们将相对准确度、精密度、线性及范围 4 个指标的验证结果编辑到一个结果页。使用该分析模板时，可将本结果页的可接受标准修改成产品的实际可接受标准。

06

验证结果的研究应用

1. 日常放行应用：报告值重复策略的调整

利用方差分析法获得方法的精密度结果，按相应公式计算不同重复策略下报告值变异。软件的计算结果与实例中展示的计算结果完全一致。

2. 样品稳定性应用：效价变化的倍数差异临界值（CFD）

利用方差分析法获得方法的精密度结果，按公式（19）计算不同重复策略下指示效价发生变化的倍数差异临界值。软件的计算结果与实例中展示的计算结果完全一致。

除了 9401 新增的验证方案二的分析模板，我还创建了验证方案一的分析模板，分析模板的计算结果同样与新 9401 验证方案一的实例中展示的计算结果完全一致。另外，我还录制了两个分析模板的使用视频。若您需要上述验证方案一和验证方案二的分析模板及使用视频，请联系我们当地销售或技术人员。